PCR实验室污染应急处理方法

PCR检测因其高灵敏度、快速、操作方便等优势已经被广泛应用，不过正是由于它灵敏度极高，极微量的污染源都有可能导致检测结果的假阳性，因此，如何避免以及处理实验室污染，对PCR人来说是一门必修课。

1、样本间交叉污染

主要是在采（取）样的过程中，由于取样工具之间的交叉造成污染；或者在核酸提取的过程中，由于移液器、离心管等使用不当导致的污染。 

2、PCR试剂的污染

主要是在PCR试剂配制过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。

3、克 隆质粒的污染

在实验室操作中经常会用到阳性参考品，这些阳性参考品大多数是由某些克 隆质粒制作而成，克 隆质粒在单位容积内浓度高，不小心使用造成污染。

4、PCR扩增产物污染

这是PCR反应中常见的污染问题。可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染，在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶，据计算一个气溶胶颗粒可含4.8万拷贝，因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。

1、若核酸样本溢出：

立即用布或纸巾覆盖，由外围向z心倾倒10%的次氯酸消 毒剂，约30分钟后，清除污染物品，再用次氯酸消 毒剂擦拭，并用75%酒精喷洒，移动紫外车定点照射1小时。

2、其他不明情况污染：

1、暂停所有实验操作；

2、清理实验室内所有物品，寻找污染来源；

3、加大实验室的通风；

4、对实验室内所有表面（台面、地面及墙面） 进行消毒；

5、75%酒精空中喷雾；

6、开启紫外消毒装置，延长紫外照射时间（4小时以上）；

7、以上措施每日进行，直至污染消除；用新试剂及确认无 污 染的器材进行原污染项目的试剂空白检测，连续3次均阴性后方可进行常规检测。